◎邁新技術(shù)交流塑料包埋不脫鈣大塊骨組織切片及染色呂榮徐新智王軍2500型切片機(jī)，制作塑料包埋不脫鈣大塊骨組織切片，獲得8~ 10Pm厚完整切片。游離片染色，著色效果良好。
1材料與方法1.1取材部位狗撓骨，大小35mmX 20%中性福爾馬林液內(nèi)固定1~2d流水沖洗1~2h1.2包埋劑的制備1號試劑：甲基丙稀酸甲脂400ml鄰苯二甲酸二丁酯100ml二甲苯500ml2號試劑：甲基丙稀酸甲酯800ml，鄰苯二甲酸二丁酯200ml 3號試劑：甲基丙稀酸甲酯800ml過氧化苯甲酰20g鄰苯二甲二丁酯200mL4號試劑：甲基丙稀酸甲酯800ml過氧化苯甲酰60g鄰苯二甲酸二丁酯200ml.（過氧化苯甲酰需在37°C烘箱內(nèi)干燥24h后方可使用，3號、4號試劑配制完畢后儲存于4C冰箱中）1.3脫水與包埋1.3.1骨組織浸入70%，80%，90%，正丁醇，無水乙醇1 11，二甲苯111，各2h 1.3.2浸入1號，2號，3號包埋劑內(nèi)各2~ 1.3.3將干燥后的樣品置于小玻璃瓶中（小玻璃瓶容量大小一般為樣本的3~5倍）1.3.4用鉛筆書寫標(biāo)簽紙，并用透明膠帶粘于玻璃瓶體上。
1.3.5將玻璃瓶放入抽真空泵內(nèi)（一0.64個大氣壓）抽1~ 1.3.6小玻璃瓶加蓋，并穿入7號針頭2個（排氣），在放入抽真空泵繼續(xù)抽1h放入37C烘箱內(nèi)1d完全凝固后，將玻璃瓶置于一30 C冰箱15min取出用布包瓶，敲碎玻璃瓶，取出包埋塊，并即時標(biāo)記。
1.4切片的制作對包埋塊適當(dāng)修整，使其能固定于切片機(jī)上。切片厚度10Pm1.5游離片染色1.5.1切片的準(zhǔn)備切片浸入0. 1%甲酸10min自來水10次/min：20010328修改日期：2001 0725作者單位：第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院全軍骨科研究所，西安710032 1.5.2染液的制備A液：固綠FCF 3.75g蒸餾水500mW水醋酸6mlB液：天青1 1.5g蒸餾水250ml.C液：堿性品紅5g將A、B、C液混合，攪拌，溶解后過濾，60C干燥，制成骨染色粉。使用前用70%乙醇100ml加骨染色粉0. 1.5.3骨粉染色液內(nèi)10min蒸餾水洗3次，無水乙醇3次/2min中性樹膠封固2結(jié)果3體會3.1影響因素（1）溫度：高溫可引起爆聚，包埋塊變脆。（2）必須充分抽真空，如抽真空不徹底，組織塊內(nèi)殘留大量氣泡，影響切片質(zhì)量，甚至造成切片完全失敗。（3）漂片水溫過高塑料易溶解，水溫過低塑料及組織不宜展平。（4）染色時間的長短決定染色的深淺。（5）過氧化苯酰的量應(yīng)根據(jù)溫度高低而定，一般為20 3.2缺點（1）周期長，從固定、脫水、浸塑、切片約需2周。（2）包埋液在聚合時易產(chǎn)生氣泡。（3）切片不易攤平。（4）由于脫片不宜做組化和雜交方面的染色，只實用于做游離染色。
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